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DNA甲基化檢測服務(wù)(BisulfitesequencingPCR,BSP)
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更新時(shí)間:2018-02-07
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DNA甲基化檢測服務(wù)
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DNA甲基化檢測服務(wù)(BisulfitesequencingPCR,BSP)
產(chǎn)品別名
DNA甲基化檢測服務(wù)
面向地區(qū)
廣東
廣州
亞硫酸氫鹽測序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)的DNA甲基化檢測方法具有較高可靠性及度,能得出片段中每一個(gè)CpG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)。
實(shí)驗(yàn)原理
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。針對目標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷哪些CpG位點(diǎn)發(fā)生了甲基化;一般將PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測序成功率會(huì)比較高。
服務(wù)的流程
1. BSP引物設(shè)計(jì):針對感興趣的基因區(qū)域進(jìn)行BSP引物的設(shè)計(jì)
2. 亞硫酸氫鹽處理基因組DNA:提取基因組DNA并進(jìn)行亞硫酸氫鹽的轉(zhuǎn)化
3. PCR擴(kuò)增目的片段:BSP引物擴(kuò)增感興趣的區(qū)域
4. 克隆到載體:將PCR產(chǎn)物純化后連接到載體上
5. 克隆測序:挑取陽性菌斑,提取質(zhì)粒并測序(10個(gè)克隆)
6. 序列分析:對測序的結(jié)果進(jìn)行比對和甲基化分析
項(xiàng)目周期
15-20個(gè)工作日
項(xiàng)目交付
1、提供完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告
2、電泳圖譜
3、測序圖譜
4、序列比對圖譜
5、分析數(shù)據(jù)
注意事項(xiàng)
1、客戶提供:要調(diào)查的基因名稱、種屬,要調(diào)查的甲基化區(qū)域或位點(diǎn);
2、樣品要求:細(xì)胞≥105個(gè);組織≥100mg;全血≥0.5ml;基因組DNA ≥5ug;
3、所有樣品建議干冰寄送,保持低溫,樣品質(zhì)量;
4、每個(gè)檢測片段序列長度不超過350bp。
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