產品介紹:
產品名稱:明黨參LAMP鑒定試劑盒
英文名稱:Radix changii
產品貨號:LZ-P3034
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年
如何進行 PCR 實驗?
一、明黨參LAMP鑒定準備實驗材料(1)DNA模板:包含你想要復制的DNA區(qū)域。(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。上海 二、設定反應混合物將所有材料混合在微量離心管中。混合物的總體積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(熱循環(huán)儀)中,并設定程序。PCR程序通常包括以下階段:(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續(xù)幾分鐘,使DNA雙鏈解開成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續(xù)20-30秒,使DNA雙鏈解開。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續(xù)20-40秒,允許引物與模板DNA結合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續(xù)1分鐘每1千個堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續(xù)5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶準備取出樣品。
PCR實驗的基本步驟:
PCR檢測試劑盒DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學酶之一,在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產生的一種DNA聚合酶,在分子生物學研究中得到廣泛應用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來源于熱液生物,能夠存活和正?;顒佑诟邷丨h(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(PCR)中起到關鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導致其生成的PCR產物末端容易出現額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應中表現出色,其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應的可靠性和準確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。
三、Tth聚合酶:
PCR檢測試劑盒Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉轉錄酶活性,可以將RNA模板合成相應的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應用,用于將RNA轉錄成DNA,并通過增加熱活性酶來實現PCR擴增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復和校正PCR產物的末端。
實驗步驟:
一.明黨參LAMP試劑盒樣品制備
1.PCR擴增并檢測。根據不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產物為10ng/nl左右為佳。
2.明黨參LAMP試劑盒PCR產物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴增產物。按照經驗,擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當增加1.5、2或3不等,同時加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產物變性。加好的樣品進行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產物復性。
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)PCR檢測試劑盒 , B7-2/sCD86 ELISA Kit
大鼠3(VD3)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD3,VD3ELISAKit
人蛋白酪酸0酸酶1B(PTP1B)試劑盒 Human protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B ELISA Kit
RatPepsin,PPELISAKit大鼠胃蛋白酶(PP)PCR檢測試劑盒
GMS10甲基化基因鈣轉感受態(tài)細菌10X100微升
MouseSomatostatin,SSPCR檢測試劑盒小鼠生長抑素(SS)PCR檢測試劑盒
豚鼠干擾素γ(IFNγ)PCR檢測試劑盒 , IFNγ ELISA Kit
Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結合蛋白(CR)PCR檢測試劑盒
rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)PCR檢測試劑盒
CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1規(guī)格:48T/96T
線蟲果蠅轉座子Mos1熱休克誘導突變試劑盒10次
rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)PCR檢測試劑盒
明黨參LAMP鑒定試劑盒Anti-GM-CSFR Alpha/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-P14ARF/FITC 熒光素標記抑癌基因p14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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ADRA2 peptide 能受體2抗原 0.5mg
SCHAD 英文名稱: 短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RASL/RASL10A Ras樣蛋白家族10A抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-P14ARF/FITC 熒光素標記抑癌基因p14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
甲基檸檬酸合酶(MCS)試劑盒可見分光光度法
780元
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780元
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乙酰輔酶A試劑盒紫外分光光度法
780元
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?;D移酶(AAT)試劑盒可見分光光度法
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可溶性淀粉合成酶(SSS)試劑盒紫外分光光度法
1300元
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結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒紫外分光光度法
1300元
產品名:結合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
NO含量試劑盒可見分光光度法
200元
產品名:NO含量,可見分光光度法,試劑盒